產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
產(chǎn)品名稱(chēng)：土壤α-木糖苷酶試劑盒科研
規格：24樣 48樣
貨號：AS098
檢測方法：可見(jiàn)分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類(lèi)：土壤系列
貯存溫度：2～8℃。
本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗。
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實(shí)驗前選取 2 個(gè)樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗流程，避免實(shí)驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本：
取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。
【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細菌/細胞樣本：
先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細菌或細胞加入 1mL
提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；
12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10
4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。
3%過(guò)氧化氫酶試劑 英文名稱(chēng)： 產(chǎn)品規格：2ml*20支
SIM動(dòng)力培養基 英文名稱(chēng)：SIM power medium 產(chǎn)品規格：250g
檸檬酸鐵銨（0.05g/支） 英文名稱(chēng)：ironcitrate 產(chǎn)品規格：1ml/支*5
LEB肉湯 英文名稱(chēng)：Listeria Enrichment Broth 產(chǎn)品規格：250g
李斯特氏菌增菌肉湯（LEB） 英文名稱(chēng)：Listeria Enrichment Broth 產(chǎn)品規格：250g
PALCAM肉湯 英文名稱(chēng)：PALCAM Broth 產(chǎn)品規格：250g
PBS緩沖液（PH7.4） 英文名稱(chēng)：PBS Solution 產(chǎn)品規格：250g
7%羊血瓊脂基礎 英文名稱(chēng)：7%Sheep Blood Agar Base 產(chǎn)品規格：250g
UVM添加劑1（萘啶酮酸4.5mg） 英文名稱(chēng)： 產(chǎn)品規格：1ml*5支
TSA-YE平板（9cm） 英文名稱(chēng)： 產(chǎn)品規格：9cm*10
土壤α-木糖苷酶試劑盒科研冰凍切組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒 50次
石蠟切組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位間接染色試劑盒 10次
石蠟切組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位直接染色試劑盒 50次
細胞衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法 50次
（SCHMORL）染色試劑盒
全組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法 10次
（SCHMORL）染色試劑盒
冰凍切組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法 50次
（SCHMORL）染色試劑盒
石蠟切組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法 10次
操作步驟:
實(shí)驗開(kāi)始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應對樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測范圍，計算時(shí)再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實(shí)驗結果有效性，每次實(shí)驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時(shí)藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗結果的準確性，底物反應時(shí)間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(cháng)依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。
